mRNA Cap2氧甲基转移酶
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferasem
mRNA Cap2氧甲基转移酶（mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase）是一种来自于牛痘病毒的重组蛋白。该酶可以在RNA的5´末端紧挨帽结构的第一个核苷酸的2´-O位置处添加一个甲基基团。该酶利用SAM作为甲基供体来甲基化加帽RNA，从而形成Cap1结构。Cap1结构能增强mRNA的翻译效率，因此可有助于改善mRNA转染和显微注射实验中的表达。该酶需要有m7GpppN即7-甲基鸟苷帽结构的RNA作为底物。
货号：mrna-om-1
产品名称：
mRNA Cap2氧甲基转移酶
英文名称：
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferasem
纯度：
纯度≥95%
规格：
2KU、20KU
状态：
Purified, Liquid
酶活定义：
一单位（U）定义为：在37℃条件下1h内甲基化10pmol的80nt带帽RNA转录物所需的酶量。
缓冲液：
1x Capping Buffer包含: 50mM Tris-HCl (pH 8.0), 5mM KCl, 1mM MgCl2, 1mM DTT
产品用途：
提高RNA的翻译效率；
改善mRNA在显微注射和转染后的表达。
产品特点：
体外加帽可避免体内免疫反应
保存条件：
冰袋运输。-20℃保存；建议分装保存，避免反复冻融。
反应体系(仅建议，以实际应用为准)：
体系组分 | 20μl（Total） |
Denatured Capped RNA | 16μl |
10x Capping Reaction Buffer | 2μl |
S-adENosylmethionine(SAM) (4 mM) | 1μl |
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μl) | 1μl |
使用方法：
1、使用RNase-free 水将适量 Capped RNA 稀释至16μl；
2、将稀释的RNA 在65℃条件下加热处理5min，反应后冰上放置 5min；
3、按表格配置反应体系（适用于10μg以内Capped RNA的甲基化反应）；
4、37℃条件下孵育1h（对与目的片段长度小于200nt RNA，可将孵育时间增加到2h）；
5、10×Capping Buffer的配置如下：500mM Tris-HCl、pH8.0、50mM KCl、10mM MgCl2、10mM DTT。
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