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Pyrophosphatase, Inorganic/PPase
无机焦磷酸酶(PPase)可催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐: P2O74-+H2O+PPase→2HPO42-。在核酸扩增、体外转录等反应中,无机焦磷酸酶可水解随着这些反应生成的无机焦磷酸盐,从而解除生成的无机焦磷酸盐对反应体系的抑制。焦磷酸盐的去除可使反应平衡向产物生成端平移,有利于提高合成产物的产量。例如RNA 和 DNA 的合成反应,在无机焦磷酸酶的作用下,反应平衡向合成产物方向移动。
货号:mrna-PI-1
产品名称:
无机焦磷酸酶
英文名称:
Pyrophosphatase, Inorganic/PPase
纯度:
>95% pure
规格:
0.5KU、1KU、10KU
状态:
Purified, Liquid
储存缓冲液:
20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 0.1mM EDTA, 1 mM dithiothreitol,50% glycerol。
活性定义:
在标准反应条件下,每分钟催化水解无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐所需要的酶量为 1 个活性单位(U)。
标准反应条件:
500 μL 反应体系中包含 100 mM Tris-HCl (pH=7.2, 25℃)、2 mMMgCl2 和 2 mM 无机焦磷酸盐,于 25℃反应 10 min。
蛋白分子量:
无机焦磷酸酶(酵母)的分子量为 71 kDa。
产品应用:
水解焦磷酸盐;
DNA合成:显著增强DNA复制能力;
RNA合成:体外转录反应中提高 RNA 产量;
使用建议:
1)该酶在多种反应 Buffer 中均具有活性,通常该 酶在HDA扩增、LAMP 扩增等实验中,直接加入即可;
2)该酶的用量在不同的实验中需要优化,通常在 0.05~1U/ml 浓度调整;
3)该酶的最佳反应温度为 25℃,其在 16~37℃均 有活性,65℃ 10min 可使该酶失活。
保存温度:
-20℃储存,避免反复冻融。
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