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LbCas12a(cpf1)蛋白/LbCas12a核酸酶
Cat No.：E-002
产品名称：
LbCas12a(cpf1)蛋白
英文名称：
LbCas12a
产品规格：
100pmol
2000pmol
经高效液相色谱（SEC-HPLC）和SDS-PAGE检测，纯度大于95%.
长期储存于-80℃，首次使用后保存于-20℃，避免反复冻融。
产品用途：
可用于基因编辑；新型基因检测和成像等。
产品描述：
目前为止已发现6种类型和超过20种的CRISPR-Cas系统亚型。 其中，CRISPR-Cas12a是第二类（V型）用于编辑哺乳动物基因组的CRISPR-Cas系统。Cas12a具有独特的功能，可以与CRISPR-Cas9系统进行互补。Cas12a ( Cpf1) 蛋白具有类似于Cas9的RuvC内切核酸酶结构域。此外，Cpf1不具有HNH内切酶结构域，并且Cas12a的N-末端不具有Cas9的α-螺旋识别叶。Cas12a执行剪切后的DNA双链断裂引入了4或5个核苷酸突出的粘性末端，研究表明LbCas12a-crRNA复合物与互补单链DNA或者双链DNA的结合释放出强大的非特异性ssDNA反式切割活性。这促使Cas 12a可以作为一种新型的基因检测和成像的工具。
Cas12诊断技术原理：
Cas12仅需在crRNA引导下即可识别靶标dsDNA，并靶向富含T的PAM位点，对靶序列进行特异性切割，同时附带非特异性切割ssDNA的活性。基于Cas12开发的分子诊断技术主要有DETECTR(图A)和HOLMES(图B)，其中HOLMES将Cas12a更换为Cas12b后，进一步升级为HOLMES v2(图C)。该三种方法原理类似，主要区别是对靶标扩增方法的选择不一样。首先，靶标核酸经等温（RPA或LAMP）或变温（PCR）方法扩增富集；然后，扩增产物与Cas12-crRNA结合，激活Cas12的附属切割功能，对ssDNA荧光探针进行切割，释放荧光基团，形成检测信号。
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