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CRISPR-Cas13a,LwaCas13a (C2c2)
Cas13a核酸酶(C2c2)是依赖于RNA介导的RNA内切核酸酶。Cas13a核酸酶(C2c2)与Cas9的区别。最大的区别在于Cas13a结合并切割RNA,而Cas9切割DNA。从结构上来看,Cas13a含有两个HEPN结构域,而Cas9用HNH和RuvC结构域来切割DNA目标。HEPN结构域对Cas13a切割RNA目标是必需的。另外,与Cas9类似,Cas13a分子中关键残基的突变可以形成核酸酶活性缺失的Cas13a(dCas13a),它能够结合RNA目标但无法切割。
此外,Cas13a一旦识别并切割由crRNA序列指定的RNA目标,它就转入了一种酶促“激活”状态,这时它将结合并切割其他的RNA,而不管它们是否与crRNA同源,或是否存在PFS。这一点与Cas9截然不同。这也称为旁路切割活性,可用于开发靶标核酸的快速检测试剂盒。Cas13a可以高特异性地检测RNA单分子。张锋团队开发出的SHERLOCK系统可检测血清、尿液和唾液中低浓度的寨卡病毒,并确定病毒载量,区分不同病毒株。它还可以对人类DNA进行基因分型,并鉴定游离DNA中的肿瘤突变。本产品中(包括Cas13a酶)都不含任何除Cas13a外的任何其他核酸酶活性。
图 Cas13a 检测示意图
产品说明:
古菌和细菌利用CRISPR-Cas系统抵御外源DNA浸染的Cas蛋白有多种,它们都是由向导RNA介导的切割目标DNA的DNA核酸内切酶,如Cas9,Cpf1,C2c1等,Cas9和Cpf1已成功开发为重要的基因编辑工具,它们可作为开展基因功能研究、寻找合适药物作用靶标的巧妙工具。Cas13a是VI型CRISPR-Cas系统效应蛋白,具有RNA介导的RNA酶切活性,是目前第二大类CRISPR-Cas系统发现的唯一能够降解RNA的蛋白,Cas9,Cpf1,C2c1均是由RNA介导的DNA核酸内切酶,对开发研究RNA工具,扩展CRISPR系统在基因编辑方面的运用具有重大价值。
产品特点:
本产品系由含有LwaCas13a基因的E.coli经发酵、分离和高度纯化后制成。
产品用途:
体外RNA切割;体外RNA检测;活细胞RNA的调控、RNA基因编辑;光学探针生物学标记。
规格参数:
货号:E-003 浓度:10000 pmol / ml 规格:100 pmol / 500 pmol / 700 pmol。
质量控制:
纯度:经高效液相色谱(SEC-HPLC)和SDS-PAGE检测,纯度大于95%。
使用说明:
4℃运输;-20℃储存,长期储存于-80℃,避免反复冻融。
在-20℃条件下有效期24个月。
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