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分子诊断技术是指以DNA和RNA为诊断材料,用分子生物学技术通过检测基因的存在、缺陷或表达异常,从而对人体状态和疾病作出诊断的技术。其基本原理是检测DNA或RNA的结构是否变化、量的多少及表达功能是否异常,以确定受检者有无基因水平的异常变化,对疾病的预防、预测、诊断、治疗和预后具有重要意义。PCR技术、基因测序技术等都属于分子诊断技术。
(一)PCR技术
PCR技术本质上是针对DNA片段进行扩增放大,通过实时荧光PCR技术使得样本中DNA含量可以检测出来。PCR原理如图1所示。
图1PCR原理示意图
PCR技术分为三步:变性--退火--延伸,即模板DNA的变性,模板DNA与引物的退火(复性),引物的延伸。重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。PCR检测流程如图2所示。
(二)基因测序技术
基因测序技术即测定DNA序列的技术。在分子生物学研究中,DNA的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。从而获得可见DNA碱基序列的一种方法。目前用于测序的技术主要有Sanger等发明的双脱氧链末端终止法和 Maxam和 Gilbert(1977)发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大,但都是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,产生 A,T,C,G四组不同长度的一系列核苷酸,然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测,从而获得DNA序列。目前 Sanger测序法得到了广泛的应用。检测流程如图3所示。
图3 DNA测序流程
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货号 | 中文名称 | 英文名称 | CAS No. | 含量 |
HA11519 | 盐酸胍 | Guanidine Hydrochloride | 50-01-1 | ≥99.0% |
HA11518 | 异硫氰酸胍 | Guanidine isothiocyanate | 593-84-0 | ≥99.0% |
HA21014 | 异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 | IPTG | 367-93-1 | ≥98.0% |
HA11521 | 二硫苏糖醇 | DTT | 3483-12-3 | ≥99.0% |
HA11522 | TCEP盐酸盐 | TCEP-HCl | 51805-45-9 | ≥98.0% |
HA11646 | 2,2'-联喹啉-4,4'-二羧酸二钠 | BCA-2Na | 979-88-4 | ≥98.0% |
HA11647 | 核糖核酸酶A | Ribonuclease A(RNase A) | 9001-99-4 | 活力≥60u/mg |
HA11648 | N,N'-亚甲基双丙烯酰胺 | N,N'-Methylenebisacrylamide | 110-26-9 | ≥98.0% |
上海惠诚生物科技有限公司自2010年成立以来,一直致力于为客户提供试剂,仪器设备和耗材一站式服务。目前在苏州和南通的研发生产基地,专注于体外诊断蛋白,靶标蛋白,工业用酶和细胞因子的生产和定制,按照GMP标准,为工业客户提供大包装蛋白原料。
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