为什么新冠抗原检测试纸过时后反应区显色或花了？为什么加水，加可乐等C线都会出来？

发布日期：2022-03-31 13:55:22 浏览量：5185

为什么新冠检测试纸过时后反应区显色或花了？为什么加水，加可乐等C线都会出来？本文就新冠抗原检测试纸技术原理及其检测、过时假阳、C线质控的原理等作简单介绍。

一、免疫胶体金技术

免疫胶体金技术根据双抗体夹心法、双抗原夹心法和竞争抑制法免疫反应原理设计，以胶体金(乳胶/胶体硒/其他)颗粒作为指示标志，标记在抗原或抗体上，抗原抗体发生免疫反应后显色，根据显色深浅定性检测病人标本中的抗体或抗原。

二、新冠抗原检测试纸技术原理

新冠抗原检测试纸根据双抗体夹心法免疫反应原理设计，以胶体金(乳胶/胶体硒/其他)颗粒作为指示标志，标记在抗体上，包被于NC膜的结合垫上，检测线上有另一种针对抗原的抗体。这个抗体识别的抗原表位和胶体金标记抗体是不一样的，所以同一个抗原能够同时被这两种抗体所识别。

三、试纸结构

试纸结构如上图。

1. 标记垫上固定胶体金标记抗体；

2. 检测区（T）包被捕获抗体；

3. 质控区（C）一般包被鸡IgY或羊抗鸡IgY。

四、检测原理

检测时，将样本滴入试剂的加样孔中，

1、如果样本中有新冠抗原，则会与预包被在结合垫上的胶体金标记抗体反应，形成抗原抗体复合物，复合物在毛细效应下继续往吸收垫方向流动，在检测区（T）与包被在NC膜上的捕获抗体反应结合。大量结合物在此聚集，则在检测区内（T）会出现红色条带，检测区内出现红色线条表明是阳性结果。

多余的胶体金标记抗体继续往吸收垫方向流动，包被在C区的鸡IgY抗体(或羊抗鸡IgY)结合，大量聚集，显色，表示试纸质量可控。

2、如果样本里没抗原，结合垫上的胶体金标记抗体则没有抗原结合，其在毛细效应下往吸收垫方向流动，因为没有抗原结合，在检测区（T）不能与包被在NC膜上的捕获抗体反应结合。在检测区内（T）没有出现红色条带，表明是阴性结果。

然后胶体金标记抗体继续往吸收垫方向流动，包被在C区的鸡IgY抗体(或羊抗鸡IgY)抗体结合，大量聚集，显色，表示试纸质量可控。

五、为什么无论加水，加可乐等C线都会出来？

C线质控原理：无论新冠抗原是否存在于样本中，标记垫上胶体金标记抗体都会继续往吸收垫方向流动至质控区（C），出现一条红色条带。质控区内（C）所显现的红色条带是判读层析过程是否正常的标准，C线的出现，说明了标记垫上包被的胶体金标记抗体有到达C区，如果都到了C区，那肯定就到了T区。所以C线也作为检测试剂的内控标准。

六、包埋线，时间久了反应区显色或花了？

新冠抗原测试纸测试时间约为15min时，此时若为阴性则试纸板很清晰的只有C线显色，但是放置较长时间后，如50min时T区隐约就有一个杠，难道是阳性吗？

不要担心，不是阳性，那是为什么呢？

1、因为层析在有效时间内是从样品垫端向NC膜单向流动，超过判断时间，由于NC膜面的持续蒸发，会导致层析方向由吸水滤纸端往NC膜方向逆流，有色标记物持续释放，C区是IgY+抗体胶体金的结合物，因为有IgY在T区会聚集。引起假阳性。这也解释了为什么超过规定时间判读时会影响结果的判读，导致结果不可靠。这个是比较重要的原因。

2、理论上样本不会和TC线结合（特别是T线，因为你关注它），但是由于T线的成分（密度，结构）与反应区其他地方不同，样本经过的时候容易沉积在这里，颜色变深显得像一条线。这个时候若重新滴点提取液，这条线就不见了。

3、口腔/鼻腔试纸特灵敏，T线被空气氧化了，颜色变深。

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