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为什么新冠抗原检测试纸过时后反应区显色或花了?为什么加水,加可乐等C线都会出来?

发布日期:2022-03-31 13:55:22   浏览量:471

为什么新冠检测试纸过时后反应区显色或花了?为什么加水,加可乐等C线都会出来?本文就新冠抗原检测试纸技术原理及其检测、过时假阳、C线质控的原理等作简单介绍。


一、免疫胶体金技术

免疫胶体金技术根据双抗体夹心法、双抗原夹心法和竞争抑制法免疫反应原理设计,以胶体金(乳胶/胶体硒/其他)颗粒作为指示标志,标记在抗原或抗体上,抗原抗体发生免疫反应后显色,根据显色深浅定性检测病人标本中的抗体或抗原。


二、新冠抗原检测试纸技术原理

新冠抗原检测试纸根据双抗体夹心法免疫反应原理设计,以胶体金(乳胶/胶体硒/其他)颗粒作为指示标志,标记在抗体上,包被于NC膜的结合垫上,检测线上有另一种针对抗原的抗体。这个抗体识别的抗原表位和胶体金标记抗体是不一样的,所以同一个抗原能够同时被这两种抗体所识别。


三、试纸结构

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试纸结构如上图。

1. 标记垫上固定胶体金标记抗体;

2. 检测区(T)包被捕获抗体;

3. 质控区(C)一般包被鸡IgY羊抗鸡IgY


四、检测原理

检测时,将样本滴入试剂的加样孔中,

1、如果样本中有新冠抗原,则会与预包被在结合垫上的胶体金标记抗体反应,形成抗原抗体复合物,复合物在毛细效应下继续往吸收垫方向流动,在检测区(T)与包被在NC膜上的捕获抗体反应结合。大量结合物在此聚集,则在检测区内(T)会出现红色条带,检测区内出现红色线条表明是阳性结果。

多余的胶体金标记抗体继续往吸收垫方向流动,包被在C区的鸡IgY抗体(或羊抗鸡IgY)结合,大量聚集,显色,表示试纸质量可控。

2、如果样本里没抗原,结合垫上的胶体金标记抗体则没有抗原结合,其在毛细效应下往吸收垫方向流动,因为没有抗原结合,在检测区(T)不能与包被在NC膜上的捕获抗体反应结合。在检测区内(T)没有出现红色条带,表明是阴性结果。

然后胶体金标记抗体继续往吸收垫方向流动,包被在C区的鸡IgY抗体(或羊抗鸡IgY)抗体结合,大量聚集,显色,表示试纸质量可控。


五、为什么无论加水,加可乐等C线都会出来?

C线质控原理:无论新冠抗原是否存在于样本中,标记垫上胶体金标记抗体都会继续往吸收垫方向流动至质控区(C),出现一条红色条带。质控区内(C)所显现的红色条带是判读层析过程是否正常的标准,C线的出现,说明了标记垫上包被的胶体金标记抗体有到达C区,如果都到了C区,那肯定就到了T区。所以C线也作为检测试剂的内控标准。


六、包埋线,时间久了反应区显色或花了?

新冠抗原测试纸测试时间约为15min时,此时若为阴性则试纸板很清晰的只有C线显色,但是放置较长时间后,如50min时T区隐约就有一个杠,难道是阳性吗?

不要担心,不是阳性,那是为什么呢?

1、因为层析在有效时间内是从样品垫端向NC膜单向流动,超过判断时间,由于NC膜面的持续蒸发,会导致层析方向由吸水滤纸端往NC膜方向逆流,有色标记物持续释放,C区是IgY+抗体胶体金的结合物,因为有IgY在T区会聚集。引起假阳性。这也解释了为什么超过规定时间判读时会影响结果的判读,导致结果不可靠。这个是比较重要的原因。

2、理论上样本不会和TC线结合(特别是T线,因为你关注它),但是由于T线的成分(密度,结构)与反应区其他地方不同,样本经过的时候容易沉积在这里,颜色变深显得像一条线。这个时候若重新滴点提取液,这条线就不见了。

3、口腔/鼻腔试纸特灵敏,T线被空气氧化了,颜色变深。


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